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酶底物法快速测定地表水中粪大肠菌群实验研究

来源:郑州天顺食品添加剂有限公司 发布时间:2021-09-12 10:03:19 关注: 0 次
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沙门氏菌群是总大肠杆菌中的一部分。 关键来源于排泄物遥在 44.5益溫度下会生长发育并发醇乳清蛋白产酸胀气的大肠杆菌称之为粪大肠菌群。用提升 塑造溫度的办法将地理环境中的大肠杆菌与排泄物中的大肠杆菌区别开, 使培育出的菌具体为来源于排泄物中的大肠杆菌, 进而更确切地体现出水体受排泄物严重污染的状况 目前袁粪大肠菌群检验最常见的办法是多管发酵和滤膜法。 可是这2种方式测量的时间段都较长袁最少必须 48 h,流程繁杂必须 认证实验,与此同时无菌操作原则对试验室硬件设施的规定 十分高。 而固定不动底物酶底物分析法 1 个试品在试验室内实际操作的時间仅必须 1 min塑造時间也减少为 24 h在一般试验室内就能开展, 酶底物法可抑 制 200 万只异常病菌精准检验到每 100 mL 试品中的 1 个粪大肠菌群。

1 试验一部分

1.1 仪器设备与实验试剂

关键仪器设备与实验试剂详细表 1。

1.2 实验原理

在塑造溫度为 44.5依1益标准下袁粪大肠菌群细 菌 能 特 异 性 产 生 茁 一 半 乳 糖 苷 ,该生物菌能够溶解色原底物释放出来色 衣原体阳性使细胞培养液呈淡黄色袁 使细胞培养液呈淡黄色转变 的原 理来测量水里粪大肠菌群。

1.3 实验步骤

1 选用 100mL 无菌检测取样瓶取 100mL 搅拌水 样 (假如水质采样粪大肠菌群数超过2005 个/L则酌情考虑少 取并且用新配制的超纯水系统稀释液至 100mL 标尺线)。 

2 在配有水质采样的取样瓶中添加科即得 TM(Colilert余)实验试剂袁充足混匀袁使实验试剂彻底融解。 

3 把融解彻底水质采样倒进无菌检测塑造定量分析盘(97孔)。

4 选用带 97 孔定量分析盘硫化橡胶托垫在全自动封口机上 开展封裝。

5 把封裝好的 97 孔定量分析盘装人 44.5 1oC 恒 温恒温箱中塑造 24h。

6 塑造 24h 后从恒温箱中取下与 97 孔呈阳性规范色度盘开展较为淡黄色孔色调比 97 孔呈阳性 规范色度盘深的说明为阳性反应依据 97 孔定量分析盘里的呈阳性孔眼 对比 IDEXX 企业供应的 MPN表报出結果。

1.3 试品来源于

水质采样来自庆阳市蒲河地下水及巴家咀地面生活用水源水体袁 依照 叶地下水和污水监测技术性规 HJ/T91-2002的要求收集并于 0耀4益超低温避 光储存6h 内开展材料分析测试。

 2 結果与探讨

2.1 实验結果
此次试验各取庆阳市蒲河地下水和巴家咀饮 用水资源水 30 份试品各自用酶底物法和多管发醇 法开展检测数据分析袁結果见表 2。

2.2 数据统计分析

应用手机软件 Excel2007, 对 2 种方式检测的粪大肠菌群結果开展匹配 t 检测袁为了更好地使 2 组数据信息呈正 态遍布 现对信息开展多数解决后再开展 t 检测結果见表 3。

由表 3 由此可见泊松相关系数r为 0.98尧0.994属 强有关渊指数越趋向 1袁关联性直越好袁表明2组 数据信息的关联性非常好曰 P=0.426 和 0.725袁跃0.05袁表明 2组数据信息无统计学意义上的显著性差异可觉得多管发酵与酶底物法试验结论具备对比性与 有关参考文献相符合具备不错的一致性。

2.3 探讨

1 酶底物法与多管发酵各自测量以庆阳 市地区的蒲河为象征的水质采样中的粪大肠菌群两 者沒有统计学意义上的差别遥 原文中的解析结论与 有关文献的结果有不错的一致性 。

2 酶底物测定方法地下水中的粪大肠菌群袁操 作简单检测的及时性好于传统式的统计分析方法袁检测周期时间短早期准备工作少袁对试验标准和工作人员规定 低袁可以更快的检测水体微生物菌种环境污染程序流程袁达到环保监测技术标准。

3 酶底物法在国外尧欧洲地区及一部分东南亚国家被普遍使用于水里尧 粪大肠菌群及肠子埃希氏菌的检验并根据英国 EPA 验证遥 我国也纳入了叶日常生活 饮 用 水 标 准 检 验 方 法 微 生 物 指 标 曳 (GB 辕 T 5750援12要2006)袁能够测量生活用水中总大肠杆菌和肠子埃希氏菌 广东质量监督局于 2013 年准许公布了行业标准叶水里菌落总数 复合型 酶底物检验方式曳(DB44 辕 T 1163要2013)遥 酶底物法在我国正逐渐逐渐营销推广 可是因为该办法的费用较高袁现阶段都还没被普遍应用 假如未来实验试剂尧耗 材价钱能有些降低 水质采样的测量范畴能进一步提 高一定会获得更快的营销推广。 

3 结果

固定不动底物酶底物测定方法水质采样中的粪大肠菌群具备较高的准确度和精确性袁与多管发酵进 行较为在统计学意义上无显著性差异 能达到环 境监测系统规定遥 该办法使用简单尧便捷袁工作中效 率获得了明显增强袁合适大批量剖析水体类试品建 议国家相关单位颁布水里粪大肠菌群酶底物统计分析方法。

申明:文中常用照片、文本来自《环境研究与监测》,著作权归原作全部。

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