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甘蓝型油菜乙酰转移酶基因的克隆及功能验证(二)

来源:郑州天顺食品添加剂有限公司 发布时间:2021-09-12 09:27:29 关注: 0 次
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2.2.2 蛋白二级结构预测分析与剖析

根据线上PredictProtein软件对AT遗传基因不一样复制编号的蛋白开展亚细胞定位发觉两个蛋白质均精准定位在细胞核;TMHMM跨膜螺旋式区分析表明,两个蛋白质均为膜外蛋白质,无跨膜结构工程。SOPMA构造预测分析说明,AT蛋白质中,无规律打卷占有率最大,均在43%上下,次之为x-螺旋式,约占35%,拓宽链约占18%,β-拐角约占4%,两蛋白质有一定差别(表4)。

2.2.3 蛋白三级构造预测分析与剖析

经SWISS-MODEL同宗模型发觉,114、148均融入酰谷丙转氨酶实体模型,但其构像略不一样(图1,2)。

2.3 过表达与RNAi影响资产重组质粒图谱

AT遗传基因的两个复制114与148过表达重组质粒见图3-A。AT遗传基因的两个复制114与148RNAi重组质粒见图3-B。

2.4 转基因水稻拟南芥检验

潮霉素挑选T0转基因水稻拟南芥种籽后(图4),对T1开展pCambia1300-35s-114、pCambia1300-RNAi-114、pCambia1300-35s-148及pCambia1300-RNAi-148媒介潮霉素评定,结果显示(图5),目地质粒T-DNA均已插进拟南芥基因,说明拟南芥转基因水稻取得成功。

由表5得知,与野生型拟南芥种籽油酸各成份对比,影响114遗传基因(114R)表述会造成 聚醚和脂肪酸成分极明显的提升,提升力度分別为10.25%,38.33%,而软脂酸和a亚麻酸是极明显的降低,降低力度分別为10.57%,17.90%,明显降低脂肪酸的成分,花生仁烯酸的成分也是有降低,可是差别不明显;过表达114遗传基因(35s-114)会造成 软脂酸、脂肪酸和脂肪酸成分的明显提升,提升力度各自做到15.52%,37.88%,12.33%,而聚醚、a亚麻酸和花生仁烯酸含万方数据量做到极明显的降低,力度分別为50.22%,10.86%,29.93%。

在对饱和脂肪与不饱和脂肪剖析中,影响114遗传基因会使饱和脂肪成分降低,对不饱和脂肪无明显危害;过表达114遗传基因会提升不饱和脂肪油酸的成分,而对饱和脂肪无明显危害。

申明:文中常用照片、文本来源于《华北农学报》,著作权归原作全部。

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