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茯苓固态发酵产物对益生菌增殖效果初探(一)

来源:郑州天顺食品添加剂有限公司 发布时间:2021-09-10 09:33:00 关注: 0 次
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伏苓做为一味食品药品兼用型细菌,其味甘、性温、深入人心、肺、胃经,具备健脾和胃的作用,伴随着科学研究创新,其使用使用价值持续获得开发设计。宋克玉等科学研究伏苓对小白鼠肠菌缓冲作用的试验中强调,高使用量组(50μg/kg)伏苓能有效的提升小白鼠肠胃内双岐杆菌的水准。沈思等发觉茯苓皮三萜萃取液对大肠埃希菌、橙黄色链球菌、绿脓杆菌都是有不错的抑制效果。但伏苓的种植周期时间约为10~12个月,且以杉木做为塑造栽培基质,导致了松料等名贵树木的消耗。有分析强调,伏苓菌丝以及液态发酵物质一样含有药理学成份。

谷类因具备多种多样的营养元素,如木薯淀粉、蛋白、营养元素等,可提供微生物菌种成长需要的营养元素,是有效的发醇栽培基质。伴随着药学科学研究的深层次,大家发觉谷类经生物发酵后,带有充足的碳水化合物、还原性糖、含糖量及酚类化合物等活性物质,能够对双岐杆菌和乳酸杆菌的益生菌粉具有繁衍的实际效果。李永明选用PCR-DGGE的办法对发醇谷类液态精饲料对断乳猪仔的肠菌多元性的分析中强调,实验组的有益菌多元性指数值、匀称度指数值和进化速率均大于对照实验;刘海燕等以发醇酶解豆柏替代50%的一切正常豆柏做成基本日粮喂养小白鼠,結果发觉小白鼠大肠埃希菌总数明显减少,乳酸杆菌总数有一定的提高。

但目前并未有关于伏苓发醇谷类对益生菌粉的繁衍实际效果的科学研究。本试验以伏苓菌为菌苗,对麦子开展发醇,以发醇物质为原材料制取萃取液,科学研究该萃取液对双岐杆菌和乳酸杆菌的身体之外繁衍实际效果,以求开发设计伏苓固态发酵物质的低聚果糖功效,为多功能性低聚果糖商品的研发给予新的构思。

一、原材料与方式

1、原材料与实验试剂

青春年少双岐杆菌,丽珠肠乐胶襄,珠海丽珠医药集团股权有限责任公司;立陶宛乳酸杆菌,福建农林高校微生物菌种工程项目试验室储存;厌氧发酵产气袋,日本三菱公司;厌氧发酵塑造盒,日本三菱公司;葡萄糖水、低聚果糖、异麦芽糖低聚木糖莫匹罗星锂盐L-胱胺酸盐酸盐;别的实验试剂皆为分析纯实验试剂。

2、仪器设备与机器设备

BSll0S电子分析天平,赛多利斯仪器设备(北京市)有限责任公司;LDZX-50KBS立柱式工作压力蒸汽灭菌锅,上海申安医疗器械厂;DHG-9203风机干燥机设备,上海精宏企业;LRH-250恒温培养箱,宁波市江南地区仪器厂;UVl100紫外线光度计,上海美谱达仪器设备有限责任公司;5804R快速冷冻离心机,法国Eppendorf企业;PBl0pH计,法国赛多利斯集团公司。

3、实验方法

(1)培养液

麦子固体培养基:先除去残渣与中空麦子颗粒物,用纯净水清洗2~3次,除去尘土、麸皮等残渣,加蒸溜水至恰好浸入麦子,于40℃水浴2h后将麦子捞起来,按料液比1:1.2添加纯净水煮至麦子圆润全熟无白心,留意麦子不可以开裂,以防止营养成分流失。将煮好的小麦粒散装于种植瓶中,一瓶110g,铺平,封口膜密封后121℃杀菌120min。

MRS改进培养液:双岐杆菌的活性培养液,参照张泽生等的方式配备。

LBS培养液:乳酸杆菌的活性培养液,参照孔彦卓等专家的方式配备。实验培养液:在MRS改进培养液(LBS培养液)中添加不一样含量的伏苓麦子萃取液,做成实验培养液。

(2)厌氧发酵塑造方式

参照鲁庆的办法开展改进。在厌氧罐中放进早已注射的试管婴儿后,放进厌氧发酵产气袋,悬紧厌氧罐,并将其用保鲜袋封住后,在37℃的防水防火式恒温培养箱中塑造一段时间。

(3)双岐杆菌及乳酸杆菌的活性

参照卢旭的办法开展改进。在灭菌自然环境下,取丽珠肠乐双岐杆菌胶襄1g于9mL0.9%盐水中稀释液,旋涡振荡器搅拌后,按10%的接种量注射于6mL活性培养液,上封2mL液体石蜡,37℃厌氧发酵塑造48h;取生长发育状况比较好的菌液传代培养2次,再度注射后塑造18h菌苗即是双岐杆菌水解液。乳酸杆菌的活性方法同样。

(4)伏苓固态发酵物质萃取液制取

依照胡开辉等的方式 ,取伏苓固态发酵25d物质,按料液比1:4(g/mL)匀浆,在匀浆后的料液中添加0.05%~0.1%酸碱性胰蛋白酶,后放进60℃恒温水浴锅开展水浴,添加0.05%~0.1%糖化酶功效2~3h。取糖化彻底后的料液,离心式后取上清,应用凹凸棒土开展过虑至回应就可以。将回应后的萃取液浓缩至1g/mL浓度值(即100g发醇麦子做成100mL中药浸膏为100%浓度值),应用时加上双蒸水配备为所需浓度值就可以。

(5)不一样双歧因子对双岐杆菌繁衍的危害

在改进MRS培养液中,各自添加2%FPE(20mg/mL)、异麦芽糖低聚木糖(IMO)和低聚果糖(FOS),对照实验为葡萄糖水(GLU)培养液。于121℃下杀菌20min,接种量为6%,37℃厌氧发酵塑造48h,测量各培养液的双岐杆菌的在600nm的OD值A600nm。和pH,反复测量3次。

(6)不一样浓度值萃取液对双岐杆菌及乳酸杆菌繁衍的危害

在改进MRS(LBS)培养液加上发酵物,使其浓度值达1%(10mg/mL)、2.5%(25mg/mL)、5%(50mg/mL)、7.5%(75mg/mL)、10%(100mg/mL),以空缺改进MRS(LBS)培养液为对比,121℃杀菌20min,接种量为6%,37℃厌氧发酵塑造48h,测量各培养液的双岐杆菌及立陶宛乳酸杆菌在600nm的OD值和pH,反复测量3次。

(7)双岐杆菌及乳酸杆菌生长曲线的测量

实验培养液为5%(50mg/mL)浓度值的FPE培养液,改进MRS培养液为对比培养液,121℃杀菌20min,接种量为6%,37℃厌氧发酵塑造,每过4h抽样测量双岐杆菌及乳杆在600nm的OD值A600nm和pH,反复测量3次。以塑造時间为横坐标轴,A600nm数值纵轴,制作二者的生长曲线。

(8)实验結果数据分析

所得的数据信息均应用SPSS20.0手机软件开展应用统计学剖析,并将测量的效果选用Excel制图。

二、結果与剖析

1、不一样双歧因子对双岐杆菌繁衍的危害

图1、表1表明的是不一样的促双歧因子对双岐杆菌的危害。数据显示,FPE能够 做为促双歧因子推动双岐杆菌生长发育,在加入了FPE以后,吸光度值可以达到3.467,是GLU基本培养液的1.3倍,加上了IMO培养液的1.09倍,加上了FOS的1.21倍,对比于葡萄糖水(GLU)对照实验来讲,差别极明显(P<0.01)。较为pH得转变能够 发觉,各加上组的pH转变基本上在3.60~4.00中间。在其中加上FPE的pH最少,IMO其次。这可能是双岐杆菌在成长的环节中,糖原磷酸原溶解造成了一些有机物(如:乳酸菌、甲酸等),造成 pH差别很大。结果显示,FPE能够 做为一种优良的双歧因子,推动其发育繁育。

申明:文中常用照片、文本来源于《中国食品添加剂》,著作权归原作全部。

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